说明:收录25万 73个行业的国家标准 支持批量下载
文库搜索
切换导航
文件分类
频道
联系我们
问题反馈
文件分类
联系我们
问题反馈
批量下载
ICS 65.020.01 B 16 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 33115—2016 水仙迟季黄化病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Narcissus late season yellows virus 2016-10-13发布 2017-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 33115—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。 和国宁波出人境检验检疫局、福建农林大学。 本标准主要起草人:沈建国、李敏、蔡伟、李桂芬、张永江、虞赞、干文涛、郭立新、高芳銮、吴祖建, I GB/T33115—2016 水仙迟季黄化病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了水仙迟季黄化病毒(Narcissuslateseasonyellowsvirus)的检疫鉴定方法。 本标准适用于可能携带水仙迟季黄化病毒的水仙及水仙产品检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样 SN/T2964 植物病毒检测规范 SN/T 3457 植物病毒分子生物学检测规范 3水仙迟季黄化病毒基本信息 中文名:水仙迟季黄化病毒。 学名:Narcissus late season yellows wirus,缩写NLSYV。 分类地位:马铃薯Y病毒科(Potyuiridae),马铃薯Y病毒属(Potyuirus)。 水仙迟季黄化病毒的其他信息参见附录A。 4方法原理 水仙迟季黄化病毒的血清学和分子生物学特性是制定本检疫鉴定方法的主要依据。 5仪器、用具及试剂 5.1仪器 高速冷冻离心机、电子天平、PCR仪、荧光PCR仪、水平电泳系统、一20℃低温冰箱和一80℃超低 温冰箱、凝胶成像分析系统、pH计、微波炉、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高压灭菌锅、超净工作台、酶标 仪等。 5.2用具 酶联板、可调移液器(2.5μL、10μL、20μL、100uL、200μL、1000μL)和可调移液器头、离心管、研 钵等。 5.3试剂 除另有规定外,所有试剂均为分析纯,实验用水应符合GB/T6682中相关规定。PTA-ELISA检测 1 GB/T33115—2016 试剂见附录B;RT-PCR检测试剂见附录C;实时荧光RT-PCR检测试剂见附录D。 6抽样和样品制备 6.1抽样 抽样方法按照SN/T2122中规定执行。 6.2样品制备 分别按照有症和无症进行样品制备,具体方法按照SN/T2964和SN/T3457中规定执行。 7检测鉴定 7.1PTA-ELISA检测 以含NLSYV材料作为阳性对照,以不含NLSYV的健康植物组织作阴性对照,同时以样品提取缓 冲液作为空白对照,具体操作见附录B。 7.2 2RT-PCR检测 以含NLSYV材料作为阳性对照,以不含NLSYV的健康植物组织作阴性对照,同时以ddHO代 替模板作为空白对照。分别提取样品和对照的总RNA,反转录合成cDNA后进行PCR检测,具体操作 见附录C。如采用商品化一步法试剂盒,则按照试剂盒说明进行。 7.3实时荧光RT-PCR检测 以含NLSYV材料作为阳性对照,以不含NLSYV的健康植物组织作阴性对照,同时以ddH,O代 替模板作为空白对照。分别提取样品和对照的总RNA,进行实时荧光RT-PCR检测,具体操作见附录 D。如采用商品化一步法试剂盒,则按照试剂盒说明进行。 8结果判定 样品检测时,检测流程及结果判定按下述原则进行: PTA-ELISA初步筛检,若检测结果为阴性,则判定样品不携带NLSYV;若检测结果为阳性, 则采用RT-PCR或实时荧光RT-PCR方法进行验证。 若验证结果为阳性,则判定样品携带NLSYV;若验证结果为阴性,则判定样品不携带 NLSYV. 9样品保存与结果记录 9.1样品保存 经检测确定携带NLSYV的样品应保存在适合的条件下以备复核。种苗、叶片等样品保存在 80℃冰箱中;做好登记和标记工作,保存期限至少6个月。 9.2 结果记录 记录包括样品来源、样品种类、检测时间、检测地点、检测方法和结果、检测人员签字。PTA-ELISA 检测应有酶联反应数值;RT-PCR检测应有电泳图片;实时荧光RT-PCR检测应有实时荧光结果图片。 2
GB-T 33115-2016 水仙迟季黄化病毒检疫鉴定方法
文档预览
中文文档
12 页
50 下载
1000 浏览
0 评论
0 收藏
3.0分
赞助2元下载(无需注册)
温馨提示:本文档共12页,可预览 3 页,如浏览全部内容或当前文档出现乱码,可开通会员下载原始文档
下载文档到电脑,方便使用
赞助2元下载
本文档由 思安 于
2023-01-21 17:31:10
上传分享
举报
下载
原文档
(1.4 MB)
分享
友情链接
YD-T 2698-2014 电信网和互联网安全防护基线配置要求及检测要求 网络设备.pdf
DB37-T 5157-2020 住宅工程质量常见问题防控技术标准 山东省.pdf
证券期货业信息系统渗透测试指南 (JRT 0276—2023).pdf
DB32-T 4264-2022 金属冶炼企业中频炉使用安全技术规范 江苏省.pdf
GB-T 39477-2020 信息安全技术 政务信息共享 数据安全技术要求.pdf
YD-T 1721-2008 电信网和互联网灾难备份及恢复实施指南.pdf
GM-T 0113-2021 在线快捷身份鉴别协议.pdf
GM T 0127-2023 移动终端密码模块应用接口规范.pdf
纯电动乘用车控制芯片功能安全要求及测试方法.pdf
NY-T 4375-2023 一体化土壤水分自动监测仪技术要求.pdf
T-CIATCM 030.9—2019 中医临床护理信息基本数据集 第9部分:消毒供应中心记录.pdf
专利 一种基于SOAR的防御自动化流程编排方法.PDF
T-CI 017—2023 离子型稀土矿区土壤生态功能恢复技术指南.pdf
DB5101-T54.1-2019 成都市智慧停车信息系统建设规范 第1部分:总则 成都市.pdf
GM-T 0020-2012 证书应用综合服务接口规范.pdf
GB 22021-2008 国家大地测量基本技术规定.pdf
GB-T 25346-2020 船舶供受燃油规程.pdf
NY-T 1520-2021 木薯.pdf
GB-T 12971.1-2023 电力牵引用接触线 第1部分:铜及铜合金接触线.pdf
GB-T 4423-2020 铜及铜合金拉制棒.pdf
交流群
-->
1
/
3
12
评价文档
赞助2元 点击下载(1.4 MB)
回到顶部
×
微信扫码支付
2
元 自动下载
官方客服微信:siduwenku
支付 完成后 如未跳转 点击这里 下载
站内资源均来自网友分享或网络收集整理,若无意中侵犯到您的权利,敬请联系我们
微信(点击查看客服)
,我们将及时删除相关资源。