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ICS11.220 CCSB41 黑龙江省绥化市地方标准DB2312 DB2312/T088—2023 禽用油乳剂灭活疫苗细菌内毒素含量 检验技术操作规程 2023-11-30发布 2024-01-01实施 绥化市市场监督管理局发布 DB2312/T088—2023 I前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由绥化市农业农村局归口。 本文件起草单位:黑龙江省百洲生物工程有限公司、明水县农业综合行政执法大队。 本文件主要起草人:张越、张洪楠、李山峰、汪洋、王海楠、王东升。 DB2312/T088—2023 1禽用油乳剂灭活疫苗细菌内毒素含量 检验技术操作规程 1范围 本文件规定了禽用油乳剂灭活疫苗细菌内毒素含量检验方法,本法为凝胶法是利用鲎试剂检测或 量化由革兰氏阴性菌产生的内毒素的方法。 本文件适用于兽用生物制品生产企业以及经营企业对禽用油乳剂灭活疫苗细菌内毒素含量范围的 检测。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适 用于本文件。 《中华人民共和国兽药典》(2020版)一部附录“细菌内毒素检查法”。 3术语和定义 《中华人民共和国兽药典》(2020版)一部附录“细菌内毒素检查法”界定的术语和定义适用于 本文件。 4主要技术内容 4.1被检疫苗处理 随机抽取油乳剂灭活疫苗1瓶,置-20℃以下条件下冷冻24h~48h,待其完全冻结后,将其取出置 室温条件下融化24h~48h,如此反复冻融3次~4次,使被检疫苗破乳分层,取适量疫苗3500r/min 离心15min后,用无热源吸管吸取下层液体作为供试品溶液。 4.2供试品溶液稀释 用细菌内毒素检查用水(内毒素小于0.015EU/ml的无菌水)将供试品溶液做一系列稀释,稀释10 倍、100倍、500倍、1000倍等不同系列,通过对供试品不同稀释倍数下的细菌内毒素检测,用相应稀 释倍数乘以鲎试剂灵敏度λ,计算供试品中所含细菌内毒素的范围。 4.2.1鲎试剂灵敏度复核实验 当使用新批号的鲎试剂或实验条件发生了任何可改变实验结果的改变时,应根据《中华人民共和 国兽药典》现行版一部附录“细菌内毒素检查法”进行灵敏度复核实验,确定鲎试剂的灵敏度与标示 值相符。 4.2.2供试品干扰试验 供试品初次进行细菌内毒素实验之前,需根据《中华人民共和国兽药典》现行版一部附录“细菌 内毒素检查法”先进行干扰试验,以检测供试品对内毒素检测试验是否有干扰或抑制作用,供试品如 对实验有干扰,可通过对供试品进行更大倍数的稀释或通过其他适宜的方法(如过滤、中和、透析或加 热处理等)排除干扰。 4.3检测步骤
DB2312-T 088-2023 禽用油乳剂灭活疫苗细菌内毒素含量检验技术操作规程 绥化市
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