ICS 65.150 B 50 GR 中华人民共和国国家标准 GB/T 18654.13—2008 养殖鱼类种质检验 第13部分：同工酶电泳分析 Inspection of germplasm for cultured fishes- Part 13:Analysis of isozyme electrophoresis 2008-06-27发布 2008-10-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T18654.13—2008 前言 GB/T18654《养殖鱼类种质检验》分为下列部分： 第1部分：检验规则； 第2部分：抽样方法； 第3部分：性状测定； 第4部分：年龄与生长的测定； 第5部分：食性分析； 第6部分：繁殖性能的测定； 第7部分：生态特性分析； 第8部分：耗氧率与临界室息点的测定； 第9部分：含肉率测定； 第10部分：肌肉营养成分的测定； 第11部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定； 第12部分：染色体组型分析； 第13部分：同工酶电泳分析； 第14部分：DNA含量的测定； 第15部分：RAPD分析； 本部分为GB/T18654的第13部分。 本部分的附录A为规范性附录。 本部分由中华人民共和国农业部提出。 本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。 本部分起草单位：上海水产大学、中国水产科学研究院长江水产研究所。 本部分主要起草人：李思发、赵金良、徐忠法、蔡完其、邹曙明。 G GB/T18654.13—2008 养殖鱼类种质检验 第13部分：同工酶电泳分析 1范围 GB/T18654的本部分规定了鱼类同工酶聚丙烯酰胺凝胶水平电泳分析的试剂与材料、仪器和设 备、抽样、分析步骤和结果判定。 本部分适用于鱼类同工酶电泳分析。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T18654的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T18654.12002养殖鱼类种质检验第1部分：检验规则 GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法 3原理 同工酶为该酶基因产物的表现型，根据其所带电荷的不同和分子大小、形状的不同，在电场和凝胶 中出现各同工酶组分不同的迁移率，经催化、染色、扫描，根据酶带迁移距离、数目及吸收强度进行分析 比较，判定鱼类物种、种群的遗传特性。 4试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。 4.1丙烯酰胺（Arc）。 4.2N',N-亚甲基双丙烯酰胺或甲叉双丙烯酰胺(Bis）。 4. 3 四甲基乙二胺（TEMED)。 4. 4 过硫酸胺。 4.5 三羟甲基氨基甲烷（Tris）。 4.6 柠檬酸。 4.7 乙二胺四乙酸（EDTA）。 4.8 硼酸。 4.9 L-组氨酸。 4. 10 乳酸。 4. 11 DL-苹果酸 4.12 2α-磷酸甘油钠。 4.13磷酸氢二钠（Na2HPO）。 4. 14 二个结晶水的磷酸二氢钠（NaH,PO·2HzO)。 4. 15 辅酶I（NAD)。 4. 16 辅酶IⅡI（NADP)。 1